單細(xì)胞技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于腫瘤，免疫，發(fā)育生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)，細(xì)胞治療，藥物研發(fā)及動(dòng)植物研究中。但并不是所有的組織都適用于單細(xì)胞RNA測序，現(xiàn)階段單細(xì)胞RNA測序研究的一個(gè)極大的挑戰(zhàn)仍是如何獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸浮液?？蒲姓邌渭?xì)胞懸液制備儀具有起始組織量小，時(shí)間短，細(xì)胞得率高，細(xì)胞活性高的特點(diǎn)。帶加熱功能，對(duì)樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)，細(xì)胞得率高達(dá)90%，方便了對(duì)真核生物進(jìn)行單細(xì)胞核RNA測序。
此次的實(shí)驗(yàn)樣品為肝組織，肝是人體的腺，可分泌膽汁，合成多種蛋白質(zhì)和脂類物質(zhì)。肝細(xì)胞能進(jìn)行物質(zhì)的合成、分解、轉(zhuǎn)化、貯存。作為消化器官，肝臟參與糖、脂類、蛋白質(zhì)三大基本物質(zhì)的代謝。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、打開儀器電源開關(guān)，將儀器界面中的模塊加熱和熱板加熱點(diǎn)開，將其兩者先預(yù)熱恒溫到37℃左右。
2、將穿刺成長條的樣本剪一部分下來直接放入凈信2ml研磨管中。
3、加入凈信消化酶，旋上蓋子，上下微微晃動(dòng)研磨管將其組織和消化酶均勻混合。
4、將混合好的研磨管放入加熱模塊中，將其研磨管中的樣品和試劑恒溫至37℃后，再將研磨管放入熱板中，蓋上蓋子。
5、啟動(dòng)Program 2（25min）
6、待儀器程序時(shí)間到之后出現(xiàn)滴滴的提示音，則打開儀器蓋子，取出樣品管
7、將樣品管中的液體和剩下的組織一起倒入過濾管中，然后再加入終止液（避免消化酶將液體中的單細(xì)胞也消化完了），得到的液體，即單細(xì)胞懸液。
實(shí)驗(yàn)效果：
樣品制備前后效果對(duì)比圖
以上就是此次單細(xì)胞懸液制備儀對(duì)肝組織的研磨全過程，可供大家進(jìn)行參考，需要注意是消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存，消化酶解凍時(shí)需在常溫條件下解凍，不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍，溫度升高對(duì)酶的活性會(huì)有很大的影響。
