單細胞測序技術的核心在于高質量單細胞懸液的制備，而香豬肝臟、卵巢、子宮、胰腺等器官因組織特性差異，傳統(tǒng)手動處理易導致細胞活性低、雜質多。借助單細胞懸液制備儀的標準化程序，可實現(xiàn)多器官組織的高效解離，為后續(xù)單細胞分析提供穩(wěn)定的樣本基礎 —— 這份實驗方案將詳解如何用儀器精準完成香豬多器官單細胞懸液制備。
實驗用儀器：
單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-12WK
實驗目的：香豬-肝臟、卵巢、子宮、胰腺制備成單細胞懸液
實驗步驟：
1、連接儀器電源，打開開關，選好程序以備用。
2、消化酶和終止液提前用流動自來水解凍，讓其混合更加均勻。
3、香豬解剖后，取出肝臟、卵巢、子宮、胰腺放入有類器官緩沖液的培養(yǎng)皿中，放在冰上。
4、將選取的組織用類器官緩沖液洗滌后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。(所有工具滅菌處理)
5、放到模塊上，選擇對應程序，點擊運行開始。
6、時間結束后儀器自動停止。
7、吸出消化好的懸液，立即鏡檢。
8、終止后，過濾單細胞懸液，離心棄上清，用基質膠重懸，進行后續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：
1、單細胞試劑盒要在-20℃低溫保存，使用時提前拿出來用涼水解凍，切記用溫熱水。
2、注意不要清洗單細胞懸液次數(shù)或時間太長，導致細胞損失。
實驗效果：
左圖為：肝臟，右圖為：胰腺
左圖為：卵巢 ，右圖為： 子宮
左圖為：子宮 ，右圖為：子宮
通過單細胞懸液制備儀的程序化操作，香豬肝臟、卵巢、子宮、胰腺組織能快速轉化為高活性單細胞懸液，既減少了手動操作的誤差，又通過標準化流程保障了不同器官樣本的一致性。遵循本方案，可高效獲得符合單細胞測序要求的懸液，為解析香豬多器官細胞異質性研究提供可靠的實驗基礎，讓單細胞制備從 “經(jīng)驗依賴” 走向 “儀器標準化”。
